H7N9 流感是一种新型禽流感。2013 年 3 月，人感染 H7N9 流感病例首次在上海市、安徽省被发现，随后给公共卫生和养禽业带来严重影响。近年来，人感染 H7N9 流感病例仍以散发形式存在。目前，H7N9 流感在家禽间呈扩散态势，分布范围已扩大到 20 多个省份。2017 年 5 月，农业部兽医局批准 10 家企业生产 H7N9 禽用疫苗，并在当年用于全国秋季集中免疫。通过采取免疫等综合防治措施，全国家禽 H7N9 流感病原学阳性率显著下降。但是，H7N9 流感污染面仍然较广，低致病性与高致病性毒株并存。
我县家禽种类众多、养殖量大；活禽交易量大、跨省调运频繁；水网湖泊众多，野鸟数量多、迁徙范围大，病毒感染家禽和跨区域传播风险依然高，防控压力较大。为了解我县规模禽场 H7N9 重组禽流感病毒二价灭活疫苗的免疫抗体水平，繁昌县动物疫病预防与控制中心组织相关人员于 2018 年 4～6 月，应用 HI 方法对我县的家禽养殖场、活禽交易市场及散养村的 1 470 份血样进行了调查分析，掌握了我县家禽养殖、流通环节 H7N9 流感病毒的流行率，以期为我县家禽 H7N9流感防控提供帮助。
1、材料和方法
1.1 样品采集
2018 年 4～6 月，从繁昌县六镇、县经济开发区 33 个规模禽场、2个活禽交易市场和 7 个散养村采集血液样品，每个场地采集 35 份血液样品，共采集样品 1 470 份，每只禽通过翅静脉采血 2～3 mL，冷藏条件下送达实验室。
1.2 样品的制备
将采集的血液样品于 3 000 r/min 条件下离心 5 min，取上清液于1.5 mL 灭菌离心管中，-20℃保存备用待检。
1.3 检测试剂及主要仪器设备
禽流感病毒 H7 亚型（H7N9 株）血凝抑制试验诊断抗原（批号2017010）和禽流感 H7 亚型阴、阳性血清（批号 2017004），购自哈尔滨维科生物技术开发公司，阿氏液、PBS 液、1%红细胞悬液等根据试验需要在实验室自配。TD4 台式低速离心机（长沙易达仪器有限公司）；Finnpipette 5~50 滋L 单道移液器及 5~50 滋L 多道移液器（Thermo Fishi-er Scientific 公司）。
1.4 方法
血凝 – 血凝抑制试验（HA-HI 试验，微量法）。按照高致病性禽流感诊断技术 [1] 和高致病性禽流感免疫技术标准进行，结果判定时按照高致病性禽流感免疫技术规范 [2] 要求进行。
2、结果
2.1 家禽 H7N9 流感抗体总体检测情况见表 1。
2.2 不同禽类 H7N9 抗体水平检测结果见表 2。
2.3 不同检测场点 H7N9 抗体水平检测结果见表 3。
3、讨论
（1）由表 1 和表 3 可以看出，本次调查共检测了 42 个场点，覆盖了繁昌县的家禽养殖场、活禽交易市场和散养村，基本上能够反映我县家禽的整体状况。由表 2 可以发现，本次调查检测涵盖种禽场、肉蛋兼用养禽场、蛋鸡场和肉禽场，能代表繁昌县不同种类免疫家禽的 H7N9抗体水平情况。结果表明种禽场、肉蛋兼用养禽场、蛋禽场 H7 抗体合格率要明显高于肉禽场，家禽养殖场 H7 抗体合格率高于活禽交易市场和散养村。
（2）种禽场、肉蛋兼用养禽场、蛋禽场 H7抗体合格率比肉禽场 HI 抗体合格率高。分析主要是因为这几种的饲养时间较长，普遍为种禽群进行多次免疫；而肉禽场由于饲养期短，基本上都只进行 1 次免疫。由此可以证明，经 2 次及以上禽流感疫苗免疫的禽只的免疫应答较好，产生的抗体效价也较高，能有效提高机体抗病能力 [3] 。另外，良好的饲养管理条件也有助于免疫工作正常开展，减少疫病传入机会，降低禽流感疫情发生的风险。
（3）家禽养殖场 H7 抗体合格率高于活禽交易市场和散养村。规模养殖禽的抗体水平高于散养的主要原因，可能是由于规模养殖户的饲养量比较大，对动物防疫较重视，积极进行防疫，各项防疫措施得到较好的落实，散养户大部分是沿用传统的养殖模式，饲养量少，防疫意识比较淡薄，有的甚至拒绝村级防疫员免费的强制免疫疫病的免疫注射，散养的粗放饲养方式易导致部分禽营养不良，这也影响了散养禽的免疫应答，从而影响了免疫效果 [3] 。活禽市场的家禽免疫抗体合格率低下，免疫情况不清，可能与免疫期超过 6 个月、漏免或免疫未产生应答等原因有关 [4-5] 。
参考文献
[1] 中华人民共和国国家质量监督检验检疫总局.GB/T18936-2003 高致病性禽流感诊断技术[S].北京：中国标准出版社，2003.
[2] 中华人民共和国农业部.NY/T769-2004 高致病性禽流感免疫技术规范[S].北京：中国农业出版社，2004.
[3] 杨其明，肖仁荣，陈仕平，等.禽流感免疫抗体监测分析评估 [J]. 畜牧与饲料科学，2009（6）：72-73.
[4] 兰玲，盛卓君.新疆地区高致病性禽流感的免疫抗体监测 [J] . 中国动物检疫，2007，2（48）：35-36.
[5] 陆桂丽，汪萍，沙依兰古丽，等.2009-2010 年新疆地区活禽市场肉鸡禽流感 H5 抗体监测与分析[J].中国动物检疫，2012，29（4）：48-50.
作者：杨文超（安徽省芜湖市繁昌县动物疫病预防与控制中心， 安徽繁昌241200）
责任编辑：曹伟胜
