鸿光麻鸡配套系核心种群禽白血病净化进展

针对鸿光麻鸡育种三系配套的 Q 系、N 系、L 系群体开展的禽白血病净化,应用禽白血病病毒(ALV)p27 抗原、ALV-A/B 亚型抗体以及ALV-J 亚型抗体 3 种 ELISA商品检测试剂盒,分别于开产(19 周)以及留种前(43 周)母鸡种蛋蛋清、公鸡泄殖腔棉拭子或病毒细胞培养物以及血清样品进行检测,根据检测结果淘汰阳性鸡,阴性鸡留种,并对留种鸡群及其种蛋、雏鸡、后备鸡、开产种鸡实施严格的生物安全措施,同时对使用的活疫苗全部进行外源病毒抽检。经过连续 6 个世代的净化,结果显示,Q 系、N 系、L 系的 p27抗原阳性率分别由 2010 年的28.19%、12.83%、20.44%下降到2016 年 的 0.77% 、0.53% 、0.81%。禽白血病净化效果显著,进展明显。

禽白血病(avian leukosis,AL)是由禽反转录病毒科甲型反转录病毒属的禽白血病病毒(avian leucosis virus,ALV)引起的鸡的良性及恶性肿瘤性疾病,主要包括淋巴白血病、髓细胞样白血病、成红细胞白血病以及成髓细胞白血病 [1-3] 。禽白血病曾给国外养鸡行业带来重大经济损失[4] ,杜岩等 [5] 自1999 年首次在国内肉鸡分离到 ALV-J,近年来,在我国大部分地区其他品系中也相继出现分离到 ALV 的报道,对国内养禽业造成严重威胁 [6] 。1987 年前后,国际大型育种公司基本消除 A、B 亚群的禽白血病,2005 年,J 亚群禽白血病也得到了控制 [7] ,该病目前尚未有用于预防和治疗 AL 的有效疫苗以及药物,对育种鸡群进行净化是目前国外的参考经验,我国近年来对禽白血病的净化防控也取得了明显的效果 [8-10]

当前国内的优质鸡消费市场主要以黄羽肉鸡为主,但麻鸡的需求量也不在少数。目前公司通过现代化育种技术的应用,结合疾病净化相关技术,进而选育鸿光麻鸡配套系。自2010 年以来开展对鸿光麻鸡配套系的禽白血病净化工作,通过借鉴国内外净化方法 [11] ,对核心种群开展了连续 6 个世代的净化,并取得了明显的进展。

1、材料和方法

1.1 材料

1.1.1 试剂 ALV-p27 抗原检测试剂盒、ALV-A/B 和 ALV-J抗体检测试剂盒为美国IDEXX 公司产品。

1.1.2 样品母鸡采集种蛋蛋清反复冻融后直接进行 p27 抗原检测;公鸡采集泄殖腔棉拭子经试剂盒配备的稀释液处理后直接检测或采集其血浆接种DF-1 细胞后再进行 p27 抗原检测。随机采集公、母鸡的血清用于 ALV-A/B 和 ALV-J 抗体检测。

1.1.3 主要检测仪器酶标仪(Thermo Scientific,型号:Multi-skan FC);洗板机(Thermo,型号:Scientific Wellwash);微量移液器(德国 Eppendorf)。

1.2 方法

1.2.1 检测方法

按常规方法 [12] 分离所采集的血清及蛋清,采用酶联免疫吸附试验(ELISA),严格按照试剂盒的操作步骤对采集的蛋清样本及泄殖腔棉拭子样本进行检测。

1.2.2 净化方案

鸿光麻鸡采用三系配套(Q 系、N 系及 L 系),自 2010年开始,分别对三个品系进行禽白血病净化,目前已经连续进行了 6 个世代的净化工作,具体育种方案见图 1,禽白血病净化方案见图 2。

1.2.3 防控路线

鸿光麻鸡配套系净化严格按照防控路线执行,并制定详细的防控方案,检测呈阴性的留种鸡群搬至经严格熏蒸消毒的鸡舍中隔离饲养,加强生产环节的消毒与管理,并且保证输精过程一鸡一管。种蛋执行严格的消毒制度,捡蛋后、入孵前进行 4~6 次消毒,孵化、出雏各个环节的环境、器具、人员要做到彻底消毒,切断一切可能造成水平传播的途径。育雏阶段及育成阶段实行小群网上笼养模式,产蛋鸡群实行单笼单鸡饲养模式,每只鸡均配有唯一的翅号标识,确保检测追溯到每只鸡。生产过程中所用到的活疫苗必须要求厂家提供外源病毒检测报告,同时对订购疫苗进行外源病毒抽检,免疫过程中所用到的器具要进行彻底消毒,避免交叉感染。具体净化防控路线见图 3。

2、结果

2.1 各品系 6 个世代 p27 抗原检测结果

由表 1 可知,经过 6 个世代的净化,各品系的总 p27 阳性率均呈明显下降趋势。Q 系总 p27 阳性率由 2010 年 的28.19%(267/947)下降到 2016年的 0.77%(21/2 722),共检测15 388 只鸡,淘汰阳性鸡 598只;N 系由 2010 年的 12.83%(130/1 013) 下 降 到 0.53%(19/3 584),共检测 23 238 只鸡,淘汰阳性鸡 405 只;L 系由2010 年的 20.44%(197/964)下降到 0.81%(31/3 816),共检测21 734 只鸡,淘汰阳性鸡 849只。

2.2 各品系 6 个世代 ALV-A/B 抗体检测结果(见表 2)

由表 2 可知,经过 6 个世代的净化,各品系的 ALV-A/B阳性率下降效果显著。Q 系ALV-A/B 抗体阳性率由 2010年的 21.67%(13/60) 下降到2016 年的 0%(0/368),共检测1 468 只鸡,淘汰阳性鸡 60 只;N 系由 2010 年 的 16.67%(10/60)下降到 0.27%(1/368),共检测 1 468 只鸡,淘汰阳性鸡 41 只 ;L 系由 2010 年 的15%(9/60) 下降到 0 %(0/184),共检测 1 238 只鸡,淘汰阳性鸡 30 只。

2.3 各品系 6 个世代 ALV-J抗体检测结果(见表 3)

由表 3 可知,经过 6 个世代的净化,各品系的 ALV-J 取得了显著的净化进展。Q 系ALV-A/B 抗体阳性率由 2010年的 28.33%(17/60) 下降到2016 年的 0.27%(1/368),共检测 1 468 只鸡,淘汰阳性鸡 56只;N 系由 2010 年的 28.33%(17/60)下降到 0.54%(2/368),共检测 1 468 只鸡,淘汰阳性鸡 47 只 ;L 系由 2010 年 的20%(12/60) 下 降 到 0.27%(1/368),共检测 1 468 只鸡,淘汰阳性鸡 25 只。

2.4 生产性能的提高(见表 4)

由表 4 可知,2016 年生产性能较 2010 年生产性能有明显提高,22~66W 平均产蛋率由 2010 年的 50.84%提高到56.71%,增长 5.87%;种蛋合格率由 92.88%提高到 94.62%,增长 1.74%;受精率由 91.59%提高到 96.43%,增长 4.84%;出雏率由 85.97% 提 高 到89.14%,增长 3.17%;健雏率由98.33%提高到 99.21%,增长0.88%;死淘率由 9.67%降低到4.90%,下降 4.77%。

6 年来,开展疾病净化不仅在生产效益方面效果显著,同时也给公司的种苗质量提供了有力的保障,近年来,销售的鸡苗在市场反映良好,饲养成活率高,料肉比较低,随着净化效果的逐渐凸显,公司的种苗销售价格也得到提高。

3、讨论

禽白血病是危害养禽业的一种主要的肿瘤性传染病,我国大多数省份养禽场中都存在不同程度的 ALV 感染 [13-14] 。该病病毒亚型较多,临床上尚无有效的治疗方案,因此进行种群净化,淘汰禽白血病病毒携带者,建立阴性留种群是防制该病最有效的措施。

鸿光麻鸡为广西地方品种鸡群,公司充分借鉴韦平 [15] 提出的净化方案,切实结合广西多年来禽白血病净化的相关经验和调查结果,制定适合本场的禽白血病净化方案。母鸡开产前 3 枚蛋蛋清及 43 周留种前种蛋蛋清进行 P27 抗原普检及 ALV-A/B、ALV-J 抗体抽检。公鸡前三个世代取开产及留种前肛拭子进行 P27 抗原检测及 ALV-A/B、ALV-J 抗体抽检,由于检测条件、设备、人力、物力及检测时间的限制,Q、L、N 三个品系净化三个世代后,在达到较高纯净度时,对鸡群各世代公鸡采用病毒分离的方法进行检测。

经过 6 个世代的禽白血病的净化工作,配套系取得了较明显的净化效果,p27 抗原 阳性率由 2010 年的20.31%(594/2 924)下降到0.7% (71/ 10 122);ALV-A/B抗体阳性率由 17.78%(32/180)下降到 0.1%(1/920);ALV-J 抗体阳性率由 25.56%(46/180) 下降到0.36%(4/1 104)。生产性能也得到显著提高,22~66W 平均产蛋率由 50.84% 上升到56.71% , 平均受精率由91.56%上升到 96.43%,死淘率由 9.67%下降到 4.90%,后代种苗质量也得到明显提升,产品的市场竞争力不断提高,切实提升企业的经济效益。

AL 的净化是长期坚持的过程,在鸿光麻鸡配套系的禽白血病净化达到了相对洁净的程度,需进一步提高净化效果,不断参考国内外的净化方案,以零检出为目标,对净化措施进一步深入。在保持目前净化方案的基础上,参考崔治中 [1] 提出的净化措施,完善 1日龄胎粪 p27 检测,淘汰阳性雏鸡及其所属留种母鸡;6 周龄育雏后期采集样品进行病毒分离,检测病毒血症,淘汰阳性鸡;调整 ELISA 检测中的判定阳性阈值,从严淘汰。管理措施上必须抓严抓实,切实做好生物安全措施,防止在孵化期、育雏期以及育成期因消毒管理不当造成水平传染,所有疫苗必须经过外源病毒抽检合格后才能用于生产防疫,做好生产数据的统计,及时调整净化路线,节约生产成本。

参考文献

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[2] Shen Y,Cai L,Wang Y,et al.Genetic mutations of avian leu-cosis virus subgroup J strains ex-tended their host range [J]. J Gen Virol,2014,95(3):691-699.

[3]乔彩霞,关云涛,陈洪岩. 禽白血病研究进展 [J]. 动物医学进展,2003,24(6):18-21.

[4] PAYNE L N,FADLY A M.Leukosis/Sarcoma group [M]//Disease of Poultry. Ames: Iowa State University Press,2008:514-568.

[5]杜岩,崔治中,秦爱建,等. 鸡的 J 亚群白血病病毒的分离及部分序列比较 [J]. 病毒学报,2000,16(4):341-346.

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[15]韦平,崔治中.地方品种鸡禽白血病和鸡白痢的危害及净化防控的实践 [J]. 中国家禽,2015,37(9):1-4.

作者:蒋维维,李毅,李志南 (广西鸿光农牧有限公司,广西容县 537500)

责任编辑:李斐

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