安灭杀种蛋消毒效果评估

1、试验目的

为了验证安灭杀种蛋消毒效果,作为甲醛替代方案,特安排此试验。

2、试验材料及场所

消毒间一个;种蛋若干;灭菌棉签 90 个;灭菌生理盐水小瓶 90 个(4mL 生理盐水 / 个);Φ3.5cm 圆形规板 1 个 ; 灭菌平板90个(Φ90mm);灭菌营养琼脂1200 mL (12~15mL×90 个平板)。

3、操作步骤

3.1 实验样品设置

消毒前,在每个消毒间的前、中、后 3 个位置分别放置 3 个蛋车,每个蛋车的上、中、下的位置分别放置一盘鸡蛋,每蛋盘上随机选择 5枚鸡蛋,检测鸡蛋表面的细菌量。

3.2 细菌检测

将特制的规板放在种蛋表面、种蛋大头朝上。每枚鸡蛋在规板内用铅笔划分开两半并标好标号,消毒前检测一半,消毒后检测另一半。在装有 4 mL 灭菌生理盐水的小瓶中沾湿灭菌的棉棒,在小瓶壁上挤去多余的盐水,然后在规板范围(一半区域)内滚动棉棒涂抹蛋壳表面取样。折去棉棒的手持端,使棉棒落入盐水小瓶中并编号,塞紧瓶盖带回试验室检验。

将带回的样品摇晃均匀用灭菌吸管取0.5mL 悬液,注入灭菌的空平皿内,摇匀,尽可能在平皿内扩散至最大面积。然后倾注融化并冷却到 45℃的普通琼脂摇晃均匀,待普通琼脂凝固后,置 37℃温箱中培养 24 h 后计数平板上的菌落数。

4、消毒及检测

一个消毒间用安灭杀雾化消毒后,密闭30min,开风机通风 5~10 min,进行消毒后检测。消毒后检测操作见 3.2。

5、注意事项

操作人员应穿灭菌工作服、戴灭菌工作帽和无菌手套;确保操作期间尽可能无菌操作,防止污染;消毒过程中房间应密闭;操作期间减少人员流动。

注意事项: (1)消毒液配比:此次消毒蛋库约 20m 2 ,高约 2m,体积约 40m 3 ,安灭杀消毒液2L(400 mL 安灭杀,1 600 mL 蒸馏水)。即:安灭杀原液 10 mL/m 3 ,蒸馏水 40 mL/m 3 ,稀释浓度1∶4。(2)此次检测样本为某大型种鸡场种蛋库处的种蛋。(3)消毒室内温度 25℃,湿度为60%。(4)雾化方法:用某厂家冷雾化机,雾滴大小 20~25μm。2 个雾化机同时雾化,14min,中途加上剩余消毒液,7min。雾化结束后密闭30min,然后通风 10min。

6、检测结果

安灭杀消毒前后效果见表 1。

7、结果分析

从以上检测结果可以看到安灭杀消毒效果比较明显,种蛋合格率平均达到 91. 11%;从上中下 3 层结果来看差距不大;而每盘 5 号(最后一个数值)均为中间位置种蛋,消毒效果也较好,说明雾化总体还是比较均匀,并能覆盖到每个种蛋。

从检测结果发现中间蛋车消毒效果最好,2个角落蛋车略差,和采用 2 个雾化机来雾化有关。

蛋车 1 中 1 枚种蛋消毒后细菌计数远远超标,这可能与该种蛋第二次采样一侧细菌污染严重有关。

8、初步建议

安灭杀消毒效果确实,无致癌性,可以替代有致癌性的甲醛消毒,减少安全隐患。

建议使用雾化效果更佳的雾化机确保雾化效果。

消毒前菌落太多,无法计数的“脏蛋”,消毒后效果不是特别明显,建议其不作种用或分开孵化。

作者:林秋燕,金家颀,向斌 (华南农业大学兽医学院,广州 510642)

责任编辑:李斐

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