1、试验目的
为了验证安灭杀种蛋消毒效果，作为甲醛替代方案，特安排此试验。
2、试验材料及场所
消毒间一个；种蛋若干；灭菌棉签 90 个；灭菌生理盐水小瓶 90 个（4mL 生理盐水 / 个）；Φ3.5cm 圆形规板 1 个 ； 灭菌平板90个（Φ90mm）；灭菌营养琼脂1200 mL (12~15mL×90 个平板）。
3、操作步骤
3.1 实验样品设置
消毒前，在每个消毒间的前、中、后 3 个位置分别放置 3 个蛋车，每个蛋车的上、中、下的位置分别放置一盘鸡蛋，每蛋盘上随机选择 5枚鸡蛋，检测鸡蛋表面的细菌量。
3.2 细菌检测
将特制的规板放在种蛋表面、种蛋大头朝上。每枚鸡蛋在规板内用铅笔划分开两半并标好标号，消毒前检测一半，消毒后检测另一半。在装有 4 mL 灭菌生理盐水的小瓶中沾湿灭菌的棉棒，在小瓶壁上挤去多余的盐水，然后在规板范围（一半区域）内滚动棉棒涂抹蛋壳表面取样。折去棉棒的手持端，使棉棒落入盐水小瓶中并编号，塞紧瓶盖带回试验室检验。
将带回的样品摇晃均匀用灭菌吸管取0.5mL 悬液，注入灭菌的空平皿内，摇匀，尽可能在平皿内扩散至最大面积。然后倾注融化并冷却到 45℃的普通琼脂摇晃均匀，待普通琼脂凝固后，置 37℃温箱中培养 24 h 后计数平板上的菌落数。
4、消毒及检测
一个消毒间用安灭杀雾化消毒后，密闭30min，开风机通风 5~10 min，进行消毒后检测。消毒后检测操作见 3.2。
5、注意事项
操作人员应穿灭菌工作服、戴灭菌工作帽和无菌手套；确保操作期间尽可能无菌操作，防止污染；消毒过程中房间应密闭；操作期间减少人员流动。
注意事项： （1）消毒液配比：此次消毒蛋库约 20m 2 ，高约 2m，体积约 40m 3 ，安灭杀消毒液2L（400 mL 安灭杀，1 600 mL 蒸馏水）。即：安灭杀原液 10 mL/m 3 ，蒸馏水 40 mL/m 3 ，稀释浓度1∶4。（2）此次检测样本为某大型种鸡场种蛋库处的种蛋。（3）消毒室内温度 25℃，湿度为60%。（4）雾化方法：用某厂家冷雾化机，雾滴大小 20～25μm。2 个雾化机同时雾化，14min，中途加上剩余消毒液，7min。雾化结束后密闭30min，然后通风 10min。
6、检测结果
安灭杀消毒前后效果见表 1。
7、结果分析
从以上检测结果可以看到安灭杀消毒效果比较明显，种蛋合格率平均达到 91. 11%；从上中下 3 层结果来看差距不大；而每盘 5 号（最后一个数值）均为中间位置种蛋，消毒效果也较好，说明雾化总体还是比较均匀，并能覆盖到每个种蛋。
从检测结果发现中间蛋车消毒效果最好，2个角落蛋车略差，和采用 2 个雾化机来雾化有关。
蛋车 1 中 1 枚种蛋消毒后细菌计数远远超标，这可能与该种蛋第二次采样一侧细菌污染严重有关。
8、初步建议
安灭杀消毒效果确实，无致癌性，可以替代有致癌性的甲醛消毒，减少安全隐患。
建议使用雾化效果更佳的雾化机确保雾化效果。
消毒前菌落太多，无法计数的“脏蛋”，消毒后效果不是特别明显，建议其不作种用或分开孵化。
作者：林秋燕，金家颀，向斌 （华南农业大学兽医学院，广州 510642）
责任编辑：李斐
